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大鼠ELISA試劑盒的測(cè)定操作的各步驟
點(diǎn)擊次數(shù):1684 更新時(shí)間:2014-10-08

摘要:大鼠ELISA試劑盒的測(cè)定操作的各步驟,它的具體問題具體分析。

*、大鼠ELISA試劑盒的應(yīng)用
ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、組織勻漿或其它相關(guān)生物液體中目標(biāo)蛋白含量。

第二、大鼠ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,計(jì)算樣品濃度。

第三、大鼠ELISA試劑盒的測(cè)定操作的各步驟
盡管ELISA測(cè)定的操作步驟非常簡(jiǎn)單,但有可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素卻較多,分布在測(cè)定操作的各步之中,尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測(cè)定中出現(xiàn)問題的可能原因,特對(duì)常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問題及可能的原因問題可能的原因。

1.弱陽性質(zhì)控樣本檢測(cè)不出 溫育的時(shí)間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時(shí)間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題。

2.大鼠ELISA試劑盒測(cè)定的重復(fù)性差這是典型的由測(cè)定操作引起的問題,a.加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;n.加樣過快,孔間發(fā)生污染。

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