ICH指導(dǎo)原則

國際人用藥品技術(shù)要求協(xié)調(diào)委員會( ICH ) 將監(jiān)管機構(gòu)和制藥行業(yè)聚集在一起討論藥品開發(fā)，注冊科學(xué)和技術(shù)，旨在簡化流程與組織結(jié)構(gòu)，以加速醫(yī)藥開發(fā)管制流程，縮短病患采用新醫(yī)藥所需要的時間。2017年ICH會議通過了中國國家食品藥品監(jiān)督管理總局的申請，總局成為國際人用藥品注冊技術(shù)協(xié)調(diào)會正式成員。目前，ICH指導(dǎo)原則已成為國際通用的指導(dǎo)原則。

ICH指導(dǎo)原則分為四類，Q：質(zhì)量指導(dǎo)原則；S : 安全性指導(dǎo)原則；E : 有效性指導(dǎo)原則；M : 多學(xué)科指導(dǎo)原則，其中章節(jié)對細胞庫的質(zhì)量有如下規(guī)定：

一、細胞基質(zhì)的來源、歷史和產(chǎn)生

為確保制品的質(zhì)量和安全性，需提供一份支持性文件，記載生產(chǎn)生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品的細胞基質(zhì)的歷史，還應(yīng)記載它們母細胞系的歷史，以便將細胞基質(zhì)在研究和開發(fā)階段所發(fā)生的事件與生產(chǎn)制品所用的特定細胞基質(zhì)相聯(lián)系來全面評估其風(fēng)險。

1、細胞的起源、來源和歷史

應(yīng)說明所用細胞基質(zhì)的細胞來源(實驗室制備或來源于菌種庫)，引證科學(xué)文獻上的相關(guān)參考資料。直接從實驗室獲得的資料是shou選的，如果沒有這些資料，也可以利用文獻。

對于動物來源細胞系，應(yīng)提供物種、品系、飼養(yǎng)條件、組織或器官的起源、地理位置、年齡和性別、致病因子的檢查結(jié)果以及原供體的一般生理狀況。

應(yīng)記錄細胞的培養(yǎng)歷史，包括最初分離細胞的方法、細胞體外培養(yǎng)的方法以及建立細胞系的方法(例如，任何物理、化學(xué)或生物學(xué)的方法，或附加的核苷酸序列)。還應(yīng)提供所有對基因操作和篩選的描述、細胞內(nèi)源性和外源性因子的鑒別、特性和檢測結(jié)果等資料。

關(guān)于細胞基質(zhì)的產(chǎn)生，應(yīng)提供詳細的制備過程中接觸的外源因子。應(yīng)提供培養(yǎng)基的組分，特別是提供關(guān)于人或動物來源的物質(zhì)，如血清、酶、水解產(chǎn)物或其他活細胞方面的資料。提供的資料還應(yīng)包括來源、制備和質(zhì)控方法、檢測結(jié)果和質(zhì)量保證。還應(yīng)提供有關(guān)上述方面的文獻。這些資料將用于分析外源因子來源的可能途徑，并作為制品風(fēng)險評估的一部分。

二、細胞庫

用連續(xù)傳代培養(yǎng)的細胞生產(chǎn)生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品的最da優(yōu)點是每批產(chǎn)品都有一個經(jīng)檢定過的共同起源。二級細胞庫即主細胞庫（MCB）和工作細胞庫(WCB)。WCB來源于一支或多支MCB。WCB是直接用于生產(chǎn)的細胞。生產(chǎn)商有責(zé)任對每個細胞庫進行檢驗，以確保其質(zhì)量。

§   生產(chǎn)商應(yīng)說明所用建庫系統(tǒng)的類型、細胞庫的大小、所用的容器(瓶子、安頓或其他合適的器皿)和密閉系統(tǒng)，用于制備細胞庫的方法包括所用的凍存劑、培養(yǎng)基以及細胞保存和貯藏的條件。

§   生產(chǎn)商應(yīng)闡明避免微生物污染和避免被實驗室中其他類型細胞交叉污染的方法，還應(yīng)介紹可追蹤細胞庫容器的方法，包括記錄系統(tǒng)，以及能經(jīng)受保存、貯藏和從貯藏中復(fù)蘇時容器的標(biāo)簽不會丟失。

生產(chǎn)商應(yīng)說明細胞建庫的過程，應(yīng)保證細胞庫的均一性，還應(yīng)使細胞保持一定的生存能力，來滿足生產(chǎn)及產(chǎn)品一致性的要求。

三、細胞庫鑒定和檢測

細胞庫檢測包括以下內(nèi)容：

1、鑒別試驗

應(yīng)采用合適的試驗證明建庫的細胞就是它本身。鑒別試驗可利用細胞的表型或遺傳型特征，但不必作所有的試驗。通常對MCB作鑒別試驗。

對于人或動物細胞，可采用形態(tài)學(xué)分析與其他試驗相結(jié)合的方法。在大多數(shù)情況下，同工酶分析足以確證人或動物細胞庫的種屬來源；依據(jù)細胞系的歷史情況，可采用其他合適的試驗。用染色體條帶分析或種屬特異性抗血清的方法可以用于鑒定種族來源，或者用染色體細胞遺傳學(xué)來檢測獨te的標(biāo)記染色體，或用DNA分析來檢測基因組多態(tài)性(例如STR)。

2、純度檢測

評估MCB和WCB的生物學(xué)純度，即游離的外源微生物和外源細胞污染，是細胞開發(fā)和建庫的關(guān)鍵部分。在設(shè)計和進行這些試驗時，應(yīng)考慮選擇性試劑和抗生素對檢測外源微生物污染的影響，主要檢測細菌、真菌、支原體的存在。

對于細胞基質(zhì)中可能污染病毒的檢測，應(yīng)根據(jù)細胞系的培養(yǎng)史，通過篩選和相關(guān)的特異性試驗，選用可檢測廣譜病毒的方法。

3、細胞基質(zhì)的穩(wěn)定性

細胞鑒定的另一個目的是考察細胞在生產(chǎn)中的適用性。細胞基質(zhì)穩(wěn)定性主要應(yīng)考慮兩個方面進行，即生產(chǎn)產(chǎn)品的一致性和貯存在規(guī)定條件下的細胞能否維持其生產(chǎn)能力。

評估培養(yǎng)期間的穩(wěn)定性，至少應(yīng)考察兩個時間點。一個時間點是采用最少傳代數(shù)的細胞，另一個時間點是申請上市的生產(chǎn)中達到或超過細胞體外傳代限度的細胞。細胞基質(zhì)穩(wěn)定性的驗證通常在每個產(chǎn)品上市申請時進行一次。

4、細胞核學(xué)和致瘤性試驗

根據(jù)細胞類型、產(chǎn)品的性質(zhì)以及生產(chǎn)工藝，決定是否有必要采用胞核學(xué)和致瘤性試驗來評價二倍體細胞系的安全性或鑒定一個新的細胞系。采用廣泛的分析方法測定非整倍染色體細胞的相對豐度未必有用。嚙齒類動物細胞系或已知為非二倍體的新細胞系不需要作細胞核學(xué)測定，因細胞遺傳學(xué)分析足以評估細胞基質(zhì)的特性或純度。對文獻已記載具有致瘤性的細胞不需重復(fù)進行致瘤性試驗。