細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生支原體污染的風(fēng)險較高。支原體天然存在于周圍空氣(氣溶膠形式)、人的體表(攜帶和隱藏)以及未徹di消毒的器物表面,而細(xì)胞培養(yǎng)基中由于含有血清,營養(yǎng)豐富,很容易導(dǎo)致支原體的快速繁殖。
支原體的污染肉眼不易察覺,直到嚴(yán)重的階段才會出現(xiàn)培養(yǎng)基變色、細(xì)胞異常等情況。支原體可造成細(xì)胞代謝改變,基因表達(dá)譜發(fā)生變化,從而嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。因此,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,定期監(jiān)測是否存在支原體污染,及時預(yù)防支原體污染是每個科研人員的工作之一。..
為防止支原體污染細(xì)胞,可采取以下措施:
1、保持無菌技術(shù):始終在無菌環(huán)境中工作,使用適當(dāng)?shù)膫€人防護(hù)設(shè)備,例如手套和實(shí)驗(yàn)室外套,定期對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔,可以使用支原體祛除試劑:Mycoplasma-off,無需配制,即噴即用;Water Shield可用于水槽、水浴鍋等處的支原體祛除和預(yù)防。保持良好的實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生:保持實(shí)驗(yàn)室清潔和維護(hù)良好,包括設(shè)備和表面。
2、使用無支原體細(xì)胞系:建議從信譽(yù)良好的供應(yīng)商提供的無支原體細(xì)胞系開始。
3、定期檢測支原體:定期檢測細(xì)胞培養(yǎng)物是否存在支原體污染至關(guān)重要??梢允褂酶鞣N測試,包括基于 PCR 的方法、熒光染色和 ELISA。
4、避免交叉污染:保持細(xì)胞培養(yǎng)分離,避免交叉污染。正確標(biāo)記和處理細(xì)胞系。
通過采取這些措施,可以降低支原體污染的風(fēng)險,并保持基于細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)的完整性和可靠性。