隨著生命科學的迅速發(fā)展,細胞工程愈來愈受到人們的重視。以昆蟲細胞為對象的細胞培養(yǎng)技術在現代實驗生物學上具有重要的價值,已經廣泛地應用于醫(yī)學、農業(yè)及生物學的各個領域。昆蟲細胞是農業(yè)生物應用方面的高新技術,主要是提取來自昆蟲的一類真核細胞。通過培養(yǎng)制造宿主的病毒,這些病毒可以引起昆蟲流行病,但對人畜和植物無害,因而可作病毒殺蟲劑。還可以生產某些藥用蛋白。
許多昆蟲培養(yǎng)基配方正不斷得到改進,以使之適于細胞生長。一般通用的商品培養(yǎng)基有Grace氏培養(yǎng)基、TC-100、IPL-41、TNM-FH以及經改良的哺乳動物細胞培養(yǎng)基TC199-MK等。
細胞培養(yǎng)的關鍵是培養(yǎng)基配方的開發(fā),已有多種培養(yǎng)基用于支持昆蟲細胞系的生長。昆蟲細胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基一般均補加FBS,血清提供了細胞生長過程中所需的營養(yǎng)物質和微量元素,使細胞能健康生長和傳代。但是FBS的使用也存在著缺點:價格高;每批血清的質量不同,影響細胞的生長和病毒復制;血清中的蛋白影響從培養(yǎng)的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難;血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲培養(yǎng)基變得很復雜。因此,無論工業(yè)上或學術上,開發(fā)無血清培養(yǎng)基都是必然的趨勢。
由于在無血清培養(yǎng)基中含有從血清或動物臟器中純化的蛋白成分,如胰島素、轉鐵蛋白、白蛋白和脂蛋白等,增加了分離純化的難度和成本。細胞在無血清低蛋白或無蛋白培養(yǎng)基環(huán)境中對剪切應力更為敏感,故需適當提高保護劑的濃度。無血清培養(yǎng)基的應用有時會降低重組蛋白的產量,在無血清培養(yǎng)基內,較高的細胞生長密度與相對較低水平的重組蛋白產量這一事實表明,促進細胞分裂的因子與促進重組蛋白生產的桿狀病毒感染晚期起作用的因子是不盡相同的。無血清培養(yǎng)基配方還需進一步改進以便適應于重組蛋白的表達。昆蟲細胞培養(yǎng)的發(fā)展和關鍵介紹