轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白：轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是膜蛋白的一大類，介導(dǎo)生物膜內(nèi)外的化學(xué)物質(zhì)以及信號(hào)交換。脂質(zhì)雙分子層在細(xì)胞或細(xì)胞器周圍形成了一道疏水屏障， 將其與周圍環(huán)境隔絕起來(lái)。盡管有一些小分子可以直接滲透通過(guò)膜，但是大部分的親水性化合物，如糖，氨基酸，離子，藥物等等，都需要特異的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的幫助來(lái)通過(guò)疏水屏障。因此，轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝取，代謝產(chǎn)物釋放以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等廣泛的細(xì)胞活動(dòng)中起著重要的作用。
載體蛋白：載體蛋白是多回旋折疊的跨膜蛋白質(zhì)，它與被傳遞的分子特異結(jié)合使其越過(guò)質(zhì)膜。其機(jī)制是載體蛋白分子的構(gòu)象可逆地變化，與被轉(zhuǎn)運(yùn)分子的親和力隨之改變而將分子傳遞過(guò)去。
載體蛋白既參與被動(dòng)的物質(zhì)運(yùn)輸，也參與主動(dòng)的物質(zhì)運(yùn)輸。由載體蛋白進(jìn)行的被動(dòng)物質(zhì)運(yùn)輸不需要ATP提供能量。載體蛋白對(duì)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程具有類似于酶與底物作用的動(dòng)力學(xué)曲線、可被類似物競(jìng)爭(zhēng)性抑制、具有競(jìng)爭(zhēng)性抑制等酶的特性。但與酶不同的是: 載體蛋白不對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)分子作任何共價(jià)修飾。
糖、氨基酸，核苷酸等水溶性小分子一般由載體蛋白運(yùn)載
最常見的載體蛋白及其偶聯(lián)方式：
載體蛋白KLH,BSA,OVA偶聯(lián)-多肽修飾肽-載體蛋白偶聯(lián)多用于制備抗多肽類抗體，單獨(dú)的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反應(yīng)，而帶有很多抗原表位的載體蛋白有利于刺激輔助性T細(xì)胞，進(jìn)一步誘導(dǎo)B細(xì)胞免疫反應(yīng)。
請(qǐng)記住，免疫系統(tǒng)是將肽-蛋白作為一個(gè)整體來(lái)激起免疫反應(yīng)的，因而產(chǎn)生的抗體中有針對(duì)多肽的，有針對(duì)鏈接劑的，也有針對(duì)載體蛋白的。其中最常見的載體蛋白有如下幾種:
KLH(KeyholeLimpetHemocyanin)，即血藍(lán)蛋白，是在某些軟體動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物(蜘蛛和甲殼蟲)的血淋巴中發(fā)現(xiàn)的一種游離的藍(lán)色呼吸色素。血藍(lán)蛋白含兩個(gè)直接連接多肽鏈的銅離子，與含鐵的血紅蛋白類似，它易于氧結(jié)合，也易與氧解離，是已知的惟一可與氧可逆結(jié)合的銅蛋白，氧化時(shí)呈青綠色，還原時(shí)呈白色。其分子量45００00～１30000。由于KLH比BSA有更高的免疫原性，因而是最常被選用的載體蛋白。
BSA(BovineSerumAlbumin)，即牛血清白蛋白，屬于最/穩(wěn)定的和可溶的白蛋白。其分子量為67x103Da（含有59個(gè)Lys）。大約有30-35個(gè)主要氨基可用于與鏈接劑發(fā)生共軛反應(yīng),使得BSA成為一種很流行的弱抗原化合物載體蛋白。
BSA的不利之處在于在很多實(shí)驗(yàn)中，它被當(dāng)作封閉劑使用，如果多肽-BSA偶聯(lián)物的抗血清用于這樣的檢測(cè)分析中，通常會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性，因?yàn)檫@些血清含有抗BSA的抗體。
OVA(Ovalbumin)，即雞卵白蛋白，分子量為45x103Da。它可作為第二載體蛋白去驗(yàn)證抗體是否特異性地只針對(duì)多肽而并非載體蛋白(如BSA)。
巰基修飾(通過(guò)Cys的側(cè)鏈)用于與KLH、BSA或OVA發(fā)生共軛反應(yīng)，所有攜帶巰基反應(yīng)的功能基團(tuán)經(jīng)修飾都可被用來(lái)發(fā)生共軛反應(yīng)。其中最常見的有以下幾種:
碘乙酰胺（Iodoacetamide）
馬來(lái)酰亞胺（Maleimide）
烷基鹵（Alkylhalide）
KLH/BSA/Ovalbumin etc 偶聯(lián)
小肽/半抗原必須耦合到載體蛋白（KLH，BSA，Ova），才可以獲得高效的抗體。一般來(lái)說(shuō)，多肽可以與蛋白偶聯(lián)的條件如下：
1.有一個(gè)自由的氨基或羧基。
2.半胱/氨酸上的-ＳＨ也可以與載體蛋白偶聯(lián)目前我公司提供高質(zhì)量的偶聯(lián)載體蛋白（KLH，BSA，OVA）。
